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而要絕對防止在顯微鏡像中把激發光和發射的熒光
混在一起。
熒光顯微鏡檢術中,顯微鏡像的質量主要取決于像的反差和像
的亮度,像反差是由樣品中特異染色的結構發射的熒光與本底上
觀察到的光之比決定的,本底光包括透過阻擋激發光的第二濾波
器的雜散激發光、組織成分的自生熒光和顯微鏡光學部分的光,
熒光顯微鏡檢術國盡全力要的是一方面獲得最佳的像反差,同時
又維持像有足夠亮度,顯然,獲得最佳反差像的辦法可能導致熒
光像的變暗,例如,由于使用又維持像有足夠 亮度,為了便于
直觀觀察和顯微照相時用適當短的曝光時間,需要足夠亮的像,
所以常要用寬波激發,于是產僅產生特異FRP的熒光,而且還有
其它組織成分的熒光,即構成非特異本底熒光,大多數應用中,
必須兼顧特異強度與非特異本底熒光在合理的低水平之間的要求
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